สรุปและคำอธิบายการทดสอบ
ไข้มาลาเรียเป็นโรคไข้เลือดออกที่มียุงเป็นพาหะ ติดเชื้อกว่า 200 ล้านคนและคร่าชีวิตผู้คนมากกว่า 1 ล้านคนต่อปีเกิดจากเชื้อพลาสโมเดียม 4 สายพันธุ์ ได้แก่ P. falciparum, P. vivax, P. ovale และ P. malariaeพลาสโมเดียเหล่านี้ติดเชื้อและทำลายเม็ดเลือดแดงของมนุษย์ ทำให้เกิดอาการหนาวสั่น มีไข้ โลหิตจาง และม้ามโตP. falciparum ทำให้เกิดโรคที่รุนแรงกว่าสายพันธุ์พลาสโมเดียลอื่น ๆ และเป็นสาเหตุการเสียชีวิตจากโรคมาลาเรียส่วนใหญ่เชื้อ P. falciparum และ P. vivax เป็นเชื้อก่อโรคที่พบได้บ่อยที่สุด อย่างไรก็ตาม การกระจายพันธุ์มีความหลากหลายทางภูมิศาสตร์อย่างมาก
ตามเนื้อผ้า มาลาเรียได้รับการวินิจฉัยโดยการสาธิตของสิ่งมีชีวิตบน Giemsa ที่มีรอยเปื้อนหนาของเลือดส่วนปลาย และพลาสโมเดียมชนิดต่างๆ นั้นมีลักษณะเฉพาะในเม็ดเลือดแดงที่ติดเชื้อเทคนิคนี้มีความสามารถในการวินิจฉัยที่แม่นยำและเชื่อถือได้ แต่เมื่อดำเนินการโดยนักจุลทรรศน์ที่มีความชำนาญโดยใช้โปรโตคอลที่กำหนดไว้เท่านั้น ซึ่งเป็นอุปสรรคสำคัญสำหรับพื้นที่ห่างไกลและยากจนของโลก
การทดสอบอย่างรวดเร็วของ Malaria Pf/Pv Ag พัฒนาขึ้นเพื่อแก้ไขอุปสรรคเหล่านี้ใช้แอนติบอดีที่จำเพาะต่อ P. falciparum Histidine Rich Protein-II (pHRP-II) และ P. vivax Lactate Dehydrogenase (Pv-LDH) เพื่อตรวจหาและแยกความแตกต่างของการติดเชื้อ P. falciparum และ P. vivax พร้อมกันการทดสอบสามารถทำได้โดยบุคลากรที่ไม่ได้รับการฝึกฝนหรือมีทักษะขั้นต่ำ โดยไม่มีอุปกรณ์ในห้องปฏิบัติการ
หลักการ
การทดสอบอย่างรวดเร็วของ Malaria Pf/Pv Ag เป็นการตรวจทางภูมิคุ้มกันด้วยโครมาโตกราฟีแบบไหลด้านข้างส่วนประกอบการทดสอบแถบประกอบด้วย: 1) แผ่นคอนจูเกตสีเบอร์กันดีที่มีแอนติบอดีต่อต้าน Pv-LDH ของหนูเมาส์ที่ผสานกับคอลลอยด์โกลด์ (คอนจูเกต Pv-LDH-ทอง) และแอนติบอดีต่อต้าน pHRP-II ของหนูเมาส์ที่ผสานด้วยคอลลอยด์โกลด์ (pHRP-II-คอนจูเกตทองคำ) 2) แถบเมมเบรนไนโตรเซลลูโลสที่มีแถบทดสอบสองแถบ (แถบ Pv และ Pf) และแถบควบคุม (แถบ C)แถบ Pv ถูกเคลือบไว้ล่วงหน้าด้วยแอนติบอดีที่จำเพาะต่อ Pv-LDH ในหนูอีกตัวสำหรับตรวจหาการติดเชื้อ Pv แถบ Pf เคลือบไว้ล่วงหน้าด้วยโพลีโคลนอลแอนติบอดีต่อต้าน pHRP-II สำหรับตรวจหาการติดเชื้อ Pf และแถบ C เคลือบด้วย IgG ของแพะที่ต่อต้านหนู
ในระหว่างการทดสอบ จะมีการจ่ายตัวอย่างเลือดในปริมาณที่เพียงพอลงในหลุมตัวอย่าง (S) ของตลับทดสอบ บัฟเฟอร์สลายจะถูกเพิ่มลงในหลุมบัฟเฟอร์ (B)บัฟเฟอร์ประกอบด้วยสารชะล้างที่สลายเซลล์เม็ดเลือดแดงและปล่อยแอนติเจนต่างๆ ซึ่งเคลื่อนย้ายโดยการกระทำของเส้นเลือดฝอยผ่านแถบที่บรรจุอยู่ในกลักกระดาษPv-LDH หากมีอยู่ในชิ้นงานจะจับกับคอนจูเกต Pv-LDH-goldจากนั้น อิมมูโนคอมเพล็กซ์จะถูกจับบนเมมเบรนโดยแอนติบอดีต่อต้าน Pv-LDH ที่เคลือบไว้ล่วงหน้า เกิดเป็นแถบ Pv สีเบอร์กันดี ซึ่งบ่งชี้ว่าผลการทดสอบ Pv เป็นบวกอีกทางหนึ่ง pHRP-II หากมีอยู่ในชิ้นงานทดสอบจะจับกับคอนจูเกต pHRP-II-ทองจากนั้น อิมมูโนคอมเพล็กซ์จะถูกจับบนเมมเบรนโดยแอนติบอดีต่อต้าน pHRP-II ที่เคลือบไว้ล่วงหน้า เกิดเป็นแถบ Pf สีเบอร์กันดี ซึ่งบ่งชี้ผลการทดสอบ Pf เป็นบวกหากไม่มีแถบทดสอบใด ๆ แสดงว่ามีผลเป็นลบการทดสอบประกอบด้วยการควบคุมภายใน (แถบ C) ซึ่งควรแสดงแถบสีเบอร์กันดีของอิมมูโนคอมเพล็กซ์ของแพะ anti-mouse IgG / mouse IgG (anti-Pv-LDH และ anti-pHRPII)-คอนจูเกตสีทอง โดยไม่คำนึงถึงการพัฒนาสีบนแถบทดสอบใดๆมิฉะนั้นผลการทดสอบจะไม่ถูกต้องและต้องทดสอบชิ้นงานทดสอบซ้ำกับอุปกรณ์อื่น
