สรุปและคำอธิบายการทดสอบ
Visceral leishmaniasis หรือ Kala-azar คือการติดเชื้อที่แพร่กระจายซึ่งมีสาเหตุมาจาก L. donovani ชนิดย่อยหลายชนิดองค์การอนามัยโลก (WHO) คาดการณ์ว่าโรคนี้จะส่งผลกระทบต่อผู้คนประมาณ 12 ล้านคนใน 88 ประเทศมันติดต่อไปยังมนุษย์โดยการกัดของแมลงปอ Phlebotomus ซึ่งได้รับการติดเชื้อจากการกินอาหารของสัตว์ที่ติดเชื้อแม้ว่าจะเป็นโรคที่พบในประเทศยากจน แต่ในยุโรปตอนใต้ แต่ก็กลายเป็นโรคติดเชื้อฉวยโอกาสชั้นนำในผู้ป่วยโรคเอดส์การจำแนกเชื้อ L. donovani จากเลือด ไขกระดูก ตับ ต่อมน้ำเหลือง หรือม้าม เป็นวิธีการวินิจฉัยที่แน่นอนการตรวจหาสารต่อต้านแอลทางซีรั่มพบว่า Donovani IgM เป็นตัวบ่งชี้ที่ดีเยี่ยมสำหรับโรคลิชมาเนียแบบเฉียบพลันในอวัยวะภายในการทดสอบที่ใช้ในคลินิกจะรวม ELISA, แอนติบอดีเรืองแสง หรือการทดสอบการเกาะติดกันโดยตรง 4-5เมื่อเร็วๆ นี้ การใช้โปรตีนจำเพาะของ L. donovani ในการทดสอบได้ปรับปรุงความไวและความจำเพาะอย่างมาก
การทดสอบอย่างรวดเร็วของ Leishmania IgG/IgM Combo เป็นการทดสอบทางเซรุ่มวิทยาโดยใช้โปรตีนลูกผสม ซึ่งจะตรวจจับแอนติบอดี IgG และ IgM กับ L. Donovani พร้อมกันการทดสอบให้ผลลัพธ์ที่เชื่อถือได้ภายใน 15 นาทีโดยไม่ต้องใช้เครื่องมือใดๆ
หลักการ
การทดสอบแบบรวดเร็วของ Leishmania IgG/IgM เป็นการตรวจทางอิมมูโนแอสเสย์แบบโครมาโตกราฟีแบบไหลด้านข้างตลับทดสอบประกอบด้วย: 1) แผ่นคอนจูเกตสีเบอร์กันดีที่ประกอบด้วยแอนติเจน L. donovani ชนิดรีคอมบิแนนท์ที่คอนจูเกตกับทองคำคอลลอยด์ (คอนจูเกตลิชมาเนีย) และคอนจูเกต IgG-ทองของกระต่าย 2) แถบเมมเบรนไนโตรเซลลูโลสที่มีแถบทดสอบสองแถบ (แถบ T1 และ T2) และแถบควบคุม (แถบ C)แถบ T1 ได้รับการเคลือบไว้ล่วงหน้าด้วยโมโนโคลนอลแอนติ-ฮิวแมน IgM เพื่อการตรวจหาแอนติ-แอลdonovani IgM, T2 band ถูกเคลือบไว้ล่วงหน้าด้วยรีเอเจนต์สำหรับการตรวจหาสารต่อต้านแอลdonovani IgG และแถบ C ถูกเคลือบไว้ล่วงหน้าด้วย IgG ต่อต้านกระต่ายของแพะ
เมื่อจ่ายชิ้นงานทดสอบในปริมาณที่เพียงพอลงในหลุมตัวอย่างของคาสเซ็ต ชิ้นงานจะเคลื่อนที่โดยการกระทำของเส้นเลือดฝอยทั่วคาสเซ็ตL. donovani IgM หากมีอยู่ในตัวอย่างจะจับกับคอนจูเกตของ Leishmaniaจากนั้น อิมมูโนคอมเพล็กซ์จะถูกจับบนเมมเบรนโดยแอนติบอดีต่อต้าน IgM ของมนุษย์ที่เคลือบไว้ล่วงหน้า ก่อตัวเป็นแถบ T1 สีแดงเบอร์กันดี ซึ่งบ่งชี้ว่าผลการทดสอบเป็นบวกของ L. donovani IgML. donovani IgG หากมีอยู่ในตัวอย่างจะจับกับคอนจูเกตของ Leishmaniaจากนั้นอิมมูโนคอมเพล็กซ์จะถูกจับโดยรีเอเจนต์ที่เคลือบไว้ล่วงหน้าบนเมมเบรน ทำให้เกิดแถบ T2 สีแดงเบอร์กันดี ซึ่งบ่งชี้ผลการทดสอบเชิงบวกของ L. donovani IgG
การไม่มีแถบ T ใด ๆ (T1 และ T2) แสดงให้เห็นผลลัพธ์ที่เป็นลบการทดสอบประกอบด้วยการควบคุมภายใน (แถบ C) ซึ่งควรแสดงแถบสีเบอร์กันดีของอิมมูโนคอมเพล็กซ์ของคอนจูเกต IgG ของกระต่ายที่ต่อต้านกระต่าย/กระต่าย IgG-ทอง โดยไม่คำนึงถึงการพัฒนาของสีบนแถบ T ใดๆมิฉะนั้นผลการทดสอบไม่ถูกต้องและต้องทดสอบชิ้นงานทดสอบซ้ำด้วยอุปกรณ์อื่น
